Viola Odorata گیاهی است چند ساله و دارای گل‌های بسیار معطر به رنگ بنفش تیره، دارای ماده مؤثر گروه مواد پپتیدی گیاهی سیکلوتایدها (Cyclotides) از جمله سیکلوویولاسین Cycloviolacin که به عنوان ضد سرطان های مختلف و همچنین طبق پژوهش‌های جدید مؤید تأثیر ضد سرطانی برخی مواد مؤثرة بنفشه از طریق اختلال در تشکیل دیواره سلولی یاخته‌های سرطانی می‌باشد بنفشه یکی از گیاهان دارویی مهم می‌باشد و همچنین به دلیل مقاومت بسیار بالا به سرما مورد توجه دانشمندان و محققان اصلاح نباتات و داروسازی و طب سنتی و مدرن قرار گرفته است. امروزه انتقال ژن مقاومت به سرما جهت اصلاح گیاهان زراعی مهم و همچنین بررسی مواد مؤثرة دارویی این گیاه جزء اهداف مهم محققان می‌باشد که برای رسیدن به این هدف بهینه‌سازی و کالوس زایی و باز زایی گیاه به روش کشت بافت پیش نیاز اصلی می‌باشد. در این پژوهش اثر محیط کشت پایه در دو سطح MS کامل و1/2MS، نوع جداکشت در دو سطح برگ و دمبرگ، غلظت اکسین 2,4-D در چهار سطح 1، 2، 3 و 4 میلی گرم در لیتر و غلظت سیتوکنین BAP در سه سطح 0، 1 و 2 میلی گرم در لیتر برالقاء کالوس بنفشه معطر Viola Odorata مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان دادکه بین نوع محیط کشت پایه MS و 1/2MS در رابطه با کالوس¬زایی اختلاف معنی داری وجود داشت. بیشترین میزان کالوس¬زایی در محیط کشت پایه 1/2MS و با سطح غلظت اکسین 4 میلی گرم در لیترو سیتوکنین BAP 2 میلی گرم در لیترو جداکشت برگ تولید شد. جداکشت دمبرگ به دلیل عدم کالوس¬زایی از محاسبات حذف گردید. غلظت¬های مختلف تنظیم¬کننده¬های رشد اکسین و سیتوکنین بر رنگ و تراکم کالوس ایجاد شده نیز موثر بود. کالوس¬های زرد رنگ و متراکم و کدر در محیط با سطح غلظت 1 میلی گرم در لیتر اکسین و1میلی گرم در لیتر سیتوکنین مشاهده شدند. کالوس های با تراکم بسیار کم و رنگ سبز روشن و بسیار شفاف در محیط با سطح غلظت اکسین 4 میلی گرم در لیتر و سیتوکنین 2 میلی گرم در لیتر مشاهده شدند. کالوس های بسیار متراکم و سفید رنگ در محیط با غلظت اکسین 1 میلی گرم در لیتر مشاهده شدند.