چکیده
برخی آنزیم های باکتریایی دارای کاربردهای صنعتی می باشند که از بین این آنزیم ها، آلفا آمیلازها 25 درصد بازار جهانی آنزیم را به خود اختصاص می دهند و در صنایع مختلف به کار می روند. باکتری های جنس باسیلوس به عنوان تولیدکنندگان آلفا آمیلازها شناخته شده اند و برای تولید تجاری این آنزیم ها استفاده می شوند. در این مقاله از چهار استرین باسیلوس جدا شده از ایران شامل B. subtilis UTB1، B. subtilis UTB70، B. amyloliquefaciens UTB96 و B. cereus PTTC1154 برای مطالعه روی توانایی آنها در تجزیه نشاسته و فعالیت آنزیم آمیلاز استفاده شد. درابتدا فعالیت آمیلاز در محیط کشت آگاردار حاوی نشاسته بررسی گردید که با توجه به هاله روشن ایجاد شده در اطراف کلونی ها پس از 48 ساعت نگهداری در دمایoC 37 ، هر چهار استرین قادر به تجزیه نشاسته بودند. تولید آنزیم آلفا آمیلاز در محیط مایع تخمیر حاوی یک درصد نشاسته انجام شد و باکتری ها در دمای oC 37به مدت 48 ساعت رشد داده شدند. میزان فعالیت آنزیم در دو دمای oC37 وoC50 با استفاده از معرف دی نیتروسالیسیلیک اسید (DNS) و اندازه¬گیری جذب در 540 نانومتر محاسبه شد. بیشترین فعالیت آنزیم در هر چهار استرین در دمای oC50 بدست آمد. استرین UTB70 بالاترین میزان فعالیت آمیلاز را در هر دو دمای oC37 (U/mL 72/1) و oC50 (U/mL 34/2) نسبت به استرین های دیگر نشان داد درحالیکه استرین UTB1 کمترین میزان فعالیت آنزیمی را نشان داد. میزان پروتئین خارج سلولی از عصاره فاقد سلولی محیط تخمیر با استفاده از روش برادفورد و پروتیئن استاندارد آلبومین سرم گاوی (BSA) اندازه گیری گردید. بیشترین و کمترین میزان پروتئین خارج سلولی به ترتیب در استرین های UTB1 (µg/mL 53/95) و PTTC1154 (µg/mL 28/31) مشاهده شد. دو استرین PTTC1154 و UTB70 بالاترین و استرین UTB1 کمترین فعالیت ویژه آنزیمی (U/mg) را نشان دادند.